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제목

단백질 정제 시 Purity와 resolution 문제가 생기면?

작성자 CLABS(ip:)

작성일 2023-02-03

조회 172

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내용

발생 가능한 문제

해결법

컬럼 패킹 불량

컬럼 성능 테스트 -> 다시 패킹하거나 패킹되어나온 제품으로 교체

컬럼 상단에 혼합 공간이 넓음

레진 표면에 Top Adapter를 조정 

용출 조건이 최적화되지 않음 (유량이 크거나 Gradient의 문제)

용출 조건 변경 ( gradient 나 유속을 조정해서 최적화 함)

컬럼에 단백질이 침전됨

컬럼 클리닝

HIC* 컬럼 : 버퍼용액 염 농도를 낮추기, 

               버퍼를 그대로 사용해야 한다면 염 농도가 낮은 샘플 사용 

IEX* 컬럼 : 버퍼와 pH,  염 조건을 조정해서 안정성을 유지

크로마토그래피 장비 튜브 길이가 너무 길거나 넓은 경우

튜브의 직경이나 길이를 최소화

컬럼의 출구 부분과 UV flow cell 사이에서 단백질이 희석되거나 분리될 때

튜빙 직경을 줄이고 길이를 최소화해서 after column volume 최소화

용량이 작은 인젝션 /컬럼밸브, 플로우 셀로 변경


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